• <s id="yetc4"><object id="yetc4"></object></s>
  • <dd id="yetc4"><pre id="yetc4"><i id="yetc4"></i></pre></dd>

    <form id="yetc4"><acronym id="yetc4"><cite id="yetc4"></cite></acronym></form>
    1. <progress id="yetc4"><pre id="yetc4"></pre></progress>

      北京引領前沿生物

        Beijing leads frontier creatures

      圖片展示

      層析柱測出10000+的柱效

      發表時間: 2019-10-04 15:19:55

      作者: 北京引領前沿生物科技有限公司

      瀏覽:

      根據塔板理論,可以計算一根色譜柱所達到的理論塔板數,或表達為每米理論塔板數n/m。把相當于一個理論塔板的柱子長度稱作理論塔板高度H,通常采用有效塔板數N和有效塔板高度L來表達柱效

      返回列表

             柱效,從名字上理解即層析柱的分離效果。層析柱的有效塔板數越大或有效的塔板高度越低,色譜柱的柱效越好。

      ※ 理論塔板數(HETP)※

             根據塔板理論,可以計算一根色譜柱所達到的理論塔板數,或表達為每米理論塔板數n/m。把相當于一個理論塔板的柱子長度稱作理論塔板高度H,通常采用有效塔板數N和有效塔板高度L來表達柱效,W為峰寬,W1/2為半峰寬:

      N=16(TR/W)2

      =5.54(TR/W1/2)2

      =L/H

             顯然,N值越大,或H值越小,柱效越高。

             柱效主要取決于所選擇的填料(即固定相),但是我們常常在使用過程中發現:同一批次填料相同規格的根層析柱,外觀一模一樣,柱效卻截然不同;同一批次填料,同一層析柱前后兩次裝填,柱效依然不同。究其根源,是裝柱的問題!

             層析柱的裝填質量無論是在確保純化過程的穩定性還是保障最終產物的安全性上都是極為重要的一環。漢邦科技ACC系列全自動軸向壓縮層析柱配套自動裝柱工作站,全自動智能化的裝柱方式能夠保證每次裝填效果一致及層析結果可重復;科學的分配器結構設計,料液分布均勻,也是提高柱效的一大法寶。

             即便有如此好的層析柱,也需要合適的柱效測定方法,才能測出高柱效!

       ※ 層析柱柱效測定方法 ※

             該方法適用于所有中低壓液相色譜的預裝柱及自己填裝的層析柱,包括測前準備、試劑選擇、測柱效操作和測試結果四個部分。

      測前準備

             ⑴層析系統。要求系統的型號與層析柱大小匹配,從上樣閥門到紫外和電導檢測器之間的體積要做到最?。ü苈穬葟奖M量細,管路盡量短),這對于準確測量實驗室小層析柱的柱效非常重要。

             ⑵測試平衡溶液及樣品。

             ⑶裝填好的層析柱。使用平衡緩沖液在測柱效的流速下至少平衡1.5 CV (柱體積),平衡方向與測柱效方向必須一致。

             ⑷進樣環。容積大于1%柱體積。

      試劑選擇

            測柱效主要有兩種測試方式:  NaCl 測試 和 丙酮測試。只要操作正確,兩種方式測量的結果基本一致。但是要注意:各試劑的濃度不能隨意更改,否則影響測試結果。

       (1)NaCl 測試

            對于所有種類的柱子和填料,都可以使用氯化鈉測柱效

            平衡液: 0.4 M NaCl 水溶液

            樣品: 0.8 M NaCl 水溶液

       (2)丙酮測試

            對于親和、離子交換和凝膠過濾技術的層析柱和填料

            平衡液: 水

            樣品: 1%丙酮的水溶液

            對于反相和疏水層析柱和填料

            平衡液: 20%乙醇

            樣品: 1%丙酮溶于20%乙醇

      測柱效操作

            測柱效全程使用30 cm/h 線性流速。平衡層析柱需要至少1.5倍柱體積(CV)的平衡液 ,將1% CV的樣品(NaCl 或丙酮)注射進入層析柱,使用平衡液沖洗直至電導或紫外280nm出現響應峰。

      測試結果

            軟件工作站自動對響應峰積分,讀取積分結果理論塔板數(HETP)與對稱性(Asymmetry)。

            注:NaCl 測試的積分曲線為電導曲線,丙酮測試的積分曲線為280nm處的UV曲線。

            Peak data 區域中將會顯示增選的分析結果判斷層析柱柱效是否合格的標準是Plates per meter 和Asymmetry。Plates per meter 要求大于說明書上要求的最低限(如 >3000 或20000),或者>1000000/平均粒徑/3 ( 計算出來就是說明書上的值) 。Asymmetry要求處于0.8~1.8 之間。滿足這兩點,說明柱子裝填沒問題。


      北京引領前沿生物科技有限公司 
      地址:北京經濟技術開發區經海四路35號院天道聯合大廈A座611室    
      電話:010-57157327    郵箱:ylqybio@163.com

      版權所有©Agricultural Aachinery引領前沿  技術支持:八戒網絡

       

      添加微信好友,詳細了解產品
      使用企業微信
      “掃一掃”加入群聊
      復制成功
      添加微信好友,詳細了解產品
      我知道了
      A级愛爱片欧美一欧美香蕉视频播放二区丨18禁黄网站禁片免费观看孕妇丨性欧美13处14处破在线观看l_丨港台精品videossex少妇